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H5N1亞型禽流感(Re-6+Re-7)疫苗在雞群的免疫抗體消長規律

作者:第一論文網 更新時間:2015年10月30日 10:03:34

高致病性禽流感(Highlypathogenic avianinfluenza,HPAI)是由正粘病毒科流感病毒屬A 型禽流感病毒(AIV) 引起的禽類高度接觸性、急性傳染病。OIE 將其列為應報告動物傳染病。AIV 分為若干亞型,其中H5、H7 亞型多為高致病性強毒株,最近的研究表明,H5型禽流感病毒與以前相比已經更容易使哺乳動物致病,并更廣泛的在鳥類中傳染, 到目前為止,已經發現了感染禽流感病毒的貓、老虎和雪豹,禽流感的宿主范圍變得越來越廣。HPAI 不僅對家禽業造成重大經濟損失,并可直接感染人,具有重要的公共衛生意義。世界不同國家采取撲殺或疫苗免疫進行有效防控HPAI, 我國H5N1 亞型禽流感滅活疫苗對雞和水禽均具有良好的免疫效果。根據AIV 株的變異趨勢,2014 年我國對H5N1 亞型禽流感疫苗病毒株進行了調整,采用Re-7疫苗病毒株代替之前使用的Re-4疫苗株制備。本研究選擇了某雞場進行新H5N1 亞型重組禽流感(Re-6+Re-7) 滅活疫苗的臨床免疫試驗,通過跟蹤檢測疫苗免疫后抗體變化情況,了解該二價疫苗免疫后的抗體消長規律和特點,評估其對Re-6和Re-7 毒株的防控效果。

一、材料和方法

1.主要實驗材料及實驗動 物。

重組H5N1 亞型AIV 滅活疫苗(Re-6+Re-7)( 批號:2014001)購自遼寧益康生物股份有限公司2012006) 和H5N1 亞型禽流感Re-6、Re-7、Re-4 株滅活血凝抗原及陽性對照血清,購自哈爾濱維科生物技術開發公司。選取鄞州區集士港鎮某雞場的三黃雞(1 500 只)進行實驗。

2. 抗體檢測方法及判定標準。

抗體檢測采用國家標準《高致病性禽流感診斷技術》(GB / T18936—2003) 中血凝(HA) 和血凝抑制(HI) 試驗方法。通過log2 的指數均值計算平均HI 抗體效價,以每份樣品的禽流感免疫抗體水平≥ 41og2為合格,并計算免疫合格率。

3. 分組及實驗設計。

在32 日齡時隨機抽取30 只雞采血,之后將雞群在33 日齡、63 日齡2 次重組H5N1 亞型二價滅活疫苗(Re-6+Re-7) 免疫( 以下簡稱二價疫苗(Re-7+Re-6)。按照說明書規定劑量進行免疫。實驗雞群分別在48 日齡、63 日齡(二免前)、84 日齡、115 日齡、147 日齡、205 日齡時隨機抽取30 只雞采血分離血清測抗體。實驗雞血清均采用HI 試驗檢測H5N1 亞型禽流感Re-7、Re-6、Re-4 抗體。

二、結果

1. 雞免疫試驗結果。

33 日齡隨機抽取30 只雞檢測Re-6、Re-7 母源抗體合格率分別為12.5% 和0%,可見母源抗體對二價疫苗(Re-6+Re-7) 的影響已經處于比較低的水平。從檢測數據看,一免后15 天Re-6 和Re-7 免疫抗體合格率分別為63.33% 和60.00%, 而且免疫抗體繼續上升,到二免前分別達到了93.33% 和90.00%, 二面后直到第205 日齡,免疫抗體都在96%以上(詳細結果見表1、表2)。

同時本試驗中還對Re-4 毒株非免疫抗體進行了檢測,顯示該類型母源抗體在33 日齡時仍處于比較高的水平,且二免前抗體合格率變化不大,二免后則快速上升并維持較高水平,最高時(二免后七周)90% 以上(詳情見表3)。

 

三、討論

 

本研究采用H5N1 亞型禽流感二價疫苗(Re-6+Re-7) 對1500只雞群進行免疫實驗,通過分析免疫抗體水平檢測評估表明, 采用H5N1 亞型禽流感二價疫苗(Re-6+Re-7),在試驗中能誘導出較高的免疫抗體,表現出良好的抗原性和免疫效果。免疫抗體跟蹤檢測結果顯示該二價苗在二免前Re-6 和Re-7 抗體合格率都可以達到90% 以上,且兩種抗體90% 以上保護率長達205 d。研究也發現,免疫抗體評價最好在首免三周以后采血檢測,才能真實評價該疫苗的免疫效果,否則可能會出現免疫效果達不到標的現象。

鑒于實驗中含有的Re-7 毒株疫苗和之前使用的Re-4 毒株疫苗同屬一個分支,親緣關系較近,因此本次實驗中將Re-4 抗體列入調查對象,結果顯示,33 日齡時,該批雞群的Re-4 母源抗體還處于比較高的水平,為31.25%,說明雞群的父母代經過了Re-4 毒株疫苗的良好免疫。實驗過程中發現了一個奇怪的現象,二免前該抗體合格率變化不是很大,二免后合格率水平則大幅上升,并維持比較高的水平,最高時(二免后七周內)甚至在90% 以上。因此對于Re-7 和Re-4 疫苗之間是否存在交叉免疫保護等現象,還有待于我們繼續研究。

不過由于本次實驗數據都是建立在對1 500 只雞群的免疫評估基層之上,每批抽樣采血的都是隨機抽取的,不排除存在雞個體差異及其他因素在實驗過程中造成的誤差,因此實驗數據都只是實驗評估數據,但本法是基層工作中常用的免疫評估方法,通過本次實驗可以得出,此種免疫評估方法在基層實際工作中具有一定的科學性和可行性,能夠滿足基層免疫

效果評價的要求。

另外,通過實時檢測雞群母源抗體的方式,是一個行之有效的首免日齡確定方法,這樣能有效減少免疫次數及免疫低效等問題,提高我們日常生產中防疫工作的效果。

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